雙孔熒光計(jì)是一種基于熒光免疫分析技術(shù)的精密儀器，廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域，某些物質(zhì)受特定波長(zhǎng)(激發(fā)波長(zhǎng))的紫外光照射后，會(huì)發(fā)射出比激發(fā)波長(zhǎng)長(zhǎng)的熒光。這些物質(zhì)可分為內(nèi)源性和外源性?xún)深?lèi)，前者如葉綠素、NADH等，后者如熒光色素、熒光染料等。
雙孔熒光計(jì)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：
1.光源系統(tǒng)：通常采用高強(qiáng)度的LED或激光作為光源，能夠提供穩(wěn)定且強(qiáng)烈的激發(fā)光。光源的波長(zhǎng)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇，以匹配不同熒光物質(zhì)的激發(fā)波長(zhǎng)。
2.激發(fā)和發(fā)射單色器：用于選擇特定的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)。激發(fā)單色器將光源發(fā)出的復(fù)色光分解成單色光，而發(fā)射單色器則負(fù)責(zé)選擇并檢測(cè)樣品發(fā)射的特定波長(zhǎng)的熒光。
3.樣品室：樣品室用于放置待測(cè)樣品，通常采用石英池等透明材料制成，以確保光線能夠順利透過(guò)樣品。
4.檢測(cè)系統(tǒng)：包括光電倍增管或其他高靈敏度的檢測(cè)器，用于捕捉并轉(zhuǎn)換熒光信號(hào)為電信號(hào)，隨后由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分析和量化。
5.雙孔設(shè)計(jì)：有兩個(gè)獨(dú)立的樣品孔，可以同時(shí)對(duì)兩個(gè)不同的樣品進(jìn)行熒光檢測(cè)，提高了工作效率。同時(shí)，雙孔設(shè)計(jì)還可以減少因樣品更換或操作不當(dāng)而引入的誤差。
雙孔熒光計(jì)的測(cè)定步驟：
-接通電源，打開(kāi)主機(jī)開(kāi)關(guān)，等待儀器自檢完成。
-根據(jù)說(shuō)明書(shū)要求啟動(dòng)計(jì)算機(jī)，并打開(kāi)熒光分光光度計(jì)軟件。
-讓儀器預(yù)熱一段時(shí)間，以確保光源穩(wěn)定(如氙燈需預(yù)熱約30分鐘)。
-在開(kāi)始測(cè)量前，進(jìn)行激發(fā)校準(zhǔn)和發(fā)射校準(zhǔn)，確保波長(zhǎng)的準(zhǔn)確性。
-可以使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校準(zhǔn)，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
-準(zhǔn)備好待測(cè)樣品，并確保其符合測(cè)試要求(如無(wú)氣泡、無(wú)雜質(zhì)等)。
-如果需要，對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?，如稀釋或濃縮。
-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置熒光激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)。
-選擇合適的狹縫寬度、PM增益、響應(yīng)時(shí)間等參數(shù)，以?xún)?yōu)化測(cè)量結(jié)果。
-將樣品放入樣品池中，并調(diào)整樣品池位置，確保其位于光路的正確位置。
-開(kāi)始測(cè)量，記錄熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)。
-如果需要，可以重復(fù)測(cè)量多次以提高準(zhǔn)確性。
-對(duì)測(cè)量得到的熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，如繪制激發(fā)光譜、發(fā)射光譜或差譜等。
-根據(jù)分析結(jié)果得出結(jié)論。
更新時(shí)間：2025-04-03 
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